是采用钼锑钪比色法测定，然后用分光光度计测量吸光度，再用直线回归方程计算出P值。但是测出结果明显偏低（包括国标样）。 参考资料：http://www.fertrec.ac.cn/fertrec/AnalyseMethodDetail.jsp?id=21
请问有那位知道问题出在那里？
样品处理：称取2.5g风干土壤加入约1g的无磷碳粉后再加入50ml碳酸氢钠提取液。在约180速率／秒下转动30分钟后用滤纸过滤。
测定：吸取待测液10ml于50ml瓶中，用吸管加5ml钼锑抗显色剂，用水稀释25ml，摇匀。30min后，在分光光度计上用2cm光径比色皿，700nm波长比色，以空白试验溶液为参比液，调吸收值到零，然后测定待测显色液的吸收值。
实验证明了～～是试制的问题，因为钼酸铵的杂质含量超标，所以导致结果出错．
土壤有效磷的测定方法很多，由于浸提剂的不同所得结果也不同。浸提剂的选择主要是根据各种土壤性质而定。一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠浸提(Olsen法)较满意；微酸性土壤可应用0.03NNH4F—0.025NHCl浸提(Bray—I法)和碳酸氢钠浸提；但中等酸性土壤采用Bray-I法优于Olsen法；强酸性／：壤则需用更强酸性的提取剂如0.03NNH4F—0.1NHCl(Bray—Ⅱ法)。
1、同—土壤用不同浸提剂提取的有效磷量相差很多，用同一浸提剂但浸提的条件不同如土液比、温度、时间、振荡方式等因子，对结果也会有很大影响。楼上所用的方法适用于石灰性土壤，再考虑考虑实验方法。
2、碳酸氢钠提取时受温度影响很大，以20℃为宜。必须严格控制浸提液的温度。为照顾各地的具体情况，规定温度幅度为20~25℃，具体分析时各批样品应在这个变幅范围内选择一个温度，便于各批结果进行相对比较。
3、实验误差。解决方法只有一个，重新做，把每一步的实验从头到尾想一遍，看到底那里出错。有时候很多实验误差都是人为造成的。本人深有体会。
参考知识1
土壤有机质测定
一、测定原理
该方法是在A.Mehlich(1984)建议土壤有机质测定方法上改进而来的，其基本原理是：土壤有机质有90%以上是腐殖质组成的，土壤的腐殖质中的胡敏酸和富啡酸均溶于碱，且呈棕褐色，当用碱提取土壤中的腐殖质时，在一定的浓度范围内，腐殖质的量与其颜色呈正比，即提取液的颜色越深，土壤有机质的含量越高。在一定的波长条件下，进行比色，可测定是土壤有机质的含量。
在测定中，土壤有机质的提取剂采用氢氧化钠、EDTA和甲醇，其中氢氧化钠主要用于土壤中的胡敏酸和富啡酸的提取，EDTA主要用于大分子腐殖酸特别是与钙结合的腐殖酸的分散，甲醇主要用于降低土粒的表面张力，能使溶液与土粒充分接触。浸提后加入Superfloc127溶液主要是使土壤溶液中的土粒凝聚，使得上部溶液澄清，以利于比色。
该方法与Mehlich的测定方法和Walkey-Black的方法均具有高度的相关性。同时该方法测定简便，同时又减少了铬的污染，是一种较好的土壤有机质测定方法。
二、试剂配制
（一） 浸提剂的配制
称取160g NaOH、74.4g EDTA二钠，放入1000mL 烧杯中，加水溶解，倒入已加水5 L 的25 L塑料桶中，再加入400 ml甲醇，最后加水至20 L，摇匀。最后各成份的浓度为0.2mol/L NaOH-0.01 mol/L EDTA-2％甲醇
（二）Superfloc127溶液
将已溶解的0.5g Superfloc127，加水定容至10 L。
三、操作步骤
取1 ml土样，放入样品杯中，用浸提剂加液器加入25 ml浸提剂，在搅拌器上10min，然后再加入25 ml Superfloc127溶液，摇匀后放置20min。再用专用稀释加器取2 ml上清液，加10 ml水，用1cm光径的比色杯，在420 nm波长处读其吸光度。
四、结果计算
在ASI方法中，可用以下公式计算土壤有机质含量：
式中:OM是土壤有机质含量，单位为%；A为吸光度。
注：在必要时，可自己进行土壤有机质标准曲线的标定，其方法是，称取在105℃下烘干4h的纯腐殖酸0.5g（如果纯度不是100%时，换算成0.5g纯腐殖酸所需的重量），放入500ml容量瓶中，加入浸提剂250ml，再用Superfloc 127溶液定容至500ml，该溶液相当于5%的土壤有机质含量。然后用移液管分别吸取该溶液10ml、8ml、6ml、4ml、2ml和0ml于不同的土样杯中，再各分别吸取0ml、1ml、2ml、3ml、4ml和5ml浸提液和Superfloc 127溶液于上述土样杯中，此时土样杯中的有机质含量分别相当于5%、4%、3%、2%、1%和0%。然后，用专用稀释加器取上述标准系列2 ml，加10 ml水，用1cm光径的比色杯，在420 nm波长处比色，分别读其吸光度。再用过原点线性方程拟合有机质含量与吸光度的关系。