苯酚浓硫酸法测多糖为啥要加三氯乙酸
2023-01-09
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参考知识1
蛋白质会影响此方法的测定结果,故需要除去。
三氯乙酸是一种有机酸,使多糖提取液中的蛋白质与有机酸作用而变性沉淀。
该法是
在多糖水提液中滴加
5
%~10
%与多糖水提取液等体积的三氯乙酸,混匀静置过夜,离心除
去胶状沉淀,重复以上的操作直至溶液不再继续混浊为止,得无蛋白质的多糖。
三氯乙酸浓度越大,除蛋白质效果越好,但对多糖的影响也越大,可能是三氯乙酸对多糖结构具有破坏作用,使多糖降解,而且这种破坏作用随着三氯乙酸浓度增大而增强。
植物多糖常采用三氯乙酸法除蛋白质,也可先用蛋白水解酶,使样品中的蛋白质部分降解后再用
Sevag
法效果更好;微生物多糖去除蛋白常采用
Sevag
法、三氟三氯乙烷法;也可用盐析法、有机溶剂萃取等方法除蛋白。