如何正确使用发酵罐
2023-02-16本文主要是 如何正确使用发酵罐 相关的知识问答，如果你也了解，请帮忙补充。
发酵罐使用方法：1、校正pH电极和溶氧电极。2、罐体灭菌。根据需要将培养基配入罐体，按要求封好后，小型发酵罐（5L）可将罐体放入大灭菌锅灭菌（115℃，30分钟）；大型发酵罐（10L及以上）采用蒸汽灭菌（121℃，30min）。3、待罐体冷却后，将其置于发酵台上，安装完好；打开冷却水，打开气泵电源，连接通气管道开始通气，调节进气旋钮使通气量适当,使罐压保持在0.05MPa；设置温度、pH、搅拌速度等，并在确定的转速和通气量下对溶氧电极进行斜率标定，数值为100%4、待温度稳定，各项参数都正确后，将预摇好的种子接入，开始发酵计时，并开始记录各种参数。5、发酵完毕后清洗罐体和电极，将pH电极插入有3M氯化钾的三角瓶中待用，溶氧电极的探头用保护套套好，保存备用。
上海艾研生物科技有限公司是一家专业经营进口实验室试剂、化工产品、实验室消耗品以及实验室器材。公司INFORS发酵罐独特的设计使Minifors灵活性极强，简单易用，操作界面化，减少用户的工作量，也节约了用户大量浪费在发酵罐维护上的时间。采用Infors 特有的金属模块夹套加热，内嵌冷却水循环回路用于控制温度，温度控制范围：高于室温培养，无需水浴降温, 减少了罐体周围的水环境, 大大降低了培养过程中染菌的概率, 低于室温培养,可以直接连接冷水机通过内嵌冷却水循环回路进行降温, 工作温度范围: 冷却介质温度+5℃－60℃。超紧凑机身设计, 不仅节省实验室空间, 管路总长度也减少30%-50%, 大大减少染菌的概率。
1、校正溶氧电极和pH电极。
2、罐体灭菌。根据需要将培养基配入罐体，按要求封好后将罐体放入大灭菌锅灭菌。
3、待罐体冷却后，将其置于发酵台上，安装完好；打开冷却水，打开气泵电源，连接通气管道开始通气，调节进气旋钮使通气量适当；打开发酵罐电源，设置温度、pH、搅拌速度等，640r/min下开机转动30min，设定溶氧电极为100。
4、待温度稳定，各项参数都正确后，将预摇好的种子接入，开始发酵计时，并开始记录各种参数。
5、发酵完毕后清洗罐体和电极，将电极插入有4M氯化钾的三角瓶中待用。
6、按要求填写登记本，由负责人签字。
发酵罐的注意事项：
1、罐体灭菌前务必检查其中液面高度，要求所有的电极都没于液面以下。
2、打开发酵罐电源前务必检查冷却水是否已打开，温度探头是否已插入槽中，否则会烧坏加热电路。
3、发酵过程中一定要保持工作台的清洁，用过的培养瓶及其它物品及时清理，因故溅出的酸碱液或水应立即擦干。
4、对罐体安装，拆卸和灭菌时要特别小心pH电极和罐体的易损又昂贵部件
参考《中国百科网》
希望我的解答对您有所帮助，祝您生活愉快！ 参考知识B 发酵罐灭菌之后，就可以用来培养细菌了。
1.接上pH电极的插头, 接通底部冷却水管和空气出口处的冷凝器上的冷却水管, 将各硅酮管置于相应的蠕动泵上。
2.把搅拌马达置于搅抖联动装置上。
3.把光标调到“Temperature”档,设定一个合适的温度。
4.校正溶氧电极的满刻度。
1)利用光标将搅拌速度调至最大转速，一般为800 r/min,把通气量调节到1.0 L Air/L medium/min(1VVM)。
2)调到calibration界面，光标调至溶氧处，“span”档,设定读数为100，反复调节几次，直至稳定至100，转至menu界面。
5.其他参数设定。把光标调到Agit档，设定最小值为200 r/min。把光标调到DO档,设定参数为合适的值, 调整为与溶氧偶联检测。把光标调到Agit档，设定最大值为800 r/min;把光标调到pH档,设定参数为7.0，调整为自动检测;接上酸(碱)瓶，并打开自动检测系统。
6.接种：发酵罐的接种就是将蘸满乙醇的棉花球缠在接种口外套上, 点燃火焰以前将接种口的盖子旋松。然后点燃发酵罐上的棉花球, 取掉盖子, 立即在火焰中加入各组分培养基和种子液。最后将盖子浸泡在乙醇中, 接种后, 用摄子将盖子准确放回原位, 旋紧。
7.打开记录实验过程的专用软件。
8.发酵过程中，每隔两小时记录溶氧、转速、测定OD600，取样品5 mL储存进行各种分析检测。
认真的对照上面的步奏进行，发酵缸的操作就顺利完成了。意大利solaris发酵罐的操作规程（SOP）供参考：
一、操作步骤
1、操作前请认真检查冷却循环水压力、无菌空气压力、进出水管、气管连接情况。
2、取下马达，平放于桌上。
3、取下冷却水进出水管和尾气冷凝管进出水管。
4、取下pH电极、溶氧电极连线、温度电极连线、消泡电极连线和液位电极连线。
5、拧开发酵罐盖上的颗螺丝，取下发酵罐盖平放于桌面上。
6、清洗罐体，装入已配好的培养基，盖上发酵罐盖，拧紧螺丝。
7、点击控制器上的calibration进行pH校正，校正完毕后装入ph电极。
8、连接好消泡剂瓶、酸碱补料瓶，取样瓶，进行灭菌。
9、把发酵罐整体放入灭菌锅内，按需求121℃灭菌20min或115℃灭菌30min。灭菌完成后，连接好冷却水管路，无菌空气管路，酸碱补料管路，装上马达，设定好转速，温度进行降温。
10、温度降至设定温度后，校正溶氧电极，搅拌转速设定为600rpm，当通入空气，溶氧为100%。
11、此时可介入种子进行发酵，发酵过程可有电脑采集并保存数据。
二、注意事项：
1、pH电极安装和拆除时必须关闭马达，以免打碎电极。
2、灭菌时，pH电极接口、溶氧电极接口、消泡电极接口、液位电极接口、温度电极接口和马达连接口必须用铝箔纸或牛皮纸包上，以免进入太多水影响使用。
3、灭菌时，取样瓶管路、消泡剂管路、酸碱补料管路、空气进气管路要夹紧，空气出口管路松开。
4、灭菌完成后，立即连接好无菌空气进气管路，以免温度降低，空气进入造成染菌。
6、酸不要放灭菌锅内灭菌，可先计算好浓度，把水灭菌后在超净工作台加入适量体积的酸。 参考知识C 发酵罐 -使用方法
1） 校正pH电极和溶氧电极。
2) 罐体灭菌。根据需要将培养基配入罐体，按要求封好后，小型发酵罐（5L）可将罐体放入大灭菌锅灭菌（115℃，30分钟）；大型发酵罐（10L及以上）采用蒸汽灭菌（121℃，30min）。
3) 待罐体冷却后，将其置于发酵台上，安装完好；打开冷却水，打开气泵电源，连接通气管道开始通气，调节进气旋钮使通气量适当,使罐压保持在0.05MPa；设置温度、pH、搅拌速度等，并在确定的转速和通气量下对溶氧电极进行斜率标定，数值为100%
4) 待温度稳定，各项参数都正确后，将预摇好的种子接入，开始发酵计时，并开始记录各种参数。
5) 发酵完毕后清洗罐体和电极，将pH电极插入有3M氯化钾的三角瓶中待用，溶氧电极的探头用保护套套好，保存备用。 参考知识D 在发酵生产中，优良菌种仅仅提供获得高产的可能性，要把这种可能性变为现实还必须给以必要的环境条件。微生物对环境条件特别敏感，而它本身又具有多种代谢途径，环境条件的改变容易引起微生物代谢的改变。所以正确地掌握和控制发酵条件，对于提高发酵产量具有十分重要的意义。
为了合理控制各种发酵条件，北京佳德建议您首先需要各种监测和测定方法，根据产品的发酵需求有选择的检测部分参数，发酵过程监控指标参数包括温度、压力、搅拌、转速、泡沫、功耗、PH、ORP、DO、以及多路气体等。一般监控系统包括三个部分，测定元件、控制部分、执行元件；控制方式又包括手动控制和自动控制两类
微生物生长和产物合成都需要合适的温度条件，发酵过程中必须保持一定的温度环境。由于微生物利用碳源、能源进行代谢活动能产生放热反应，此外，搅拌也能产生一定热量，因此发酵过程中升温的快慢常常可以作为判断发酵速度的粗略参考。发酵正常，菌体生长繁殖旺盛时自然升温较快，发酵后期，升温较缓慢，为了维持生长的适合温度必须在发酵过程随时调节发酵罐传热装置内冷却水或蒸汽来维持发酵液的温度。
各类微生物的生长、繁殖有共自身所需的最适pH，产物的合成往往也需一定的 pH环境。许多微生物在不同的pH 条件下，往往能进行不同的代谢过程
关于发酵生产中控制pH的方法，北京佳德采用的是全自动自控系统进行补料。
发过程中，由于通入大量无菌空气，同时微生物代谢产生CO，在剧烈的机械搅拌下，气体被分割成无数的小气泡，同时由于培养基中含有蛋白质、糖类等发泡性物质。因此，发酵过程中，往往产生泡沫，这是正常现象。但是，大量持久泡沫会给发酵带来不利影响。泡沫的存在造成气泡体积增大，使培养茶溶氧降低，CO的排出受阻，影响微生物正常代谢，如果泡沫上升过高，又不加控制，还会造成发酵液沿排气管道逸出或泡沫升至罐顶，由轴封处渗出，造成染菌。
解决泡沫的问题首先应尽量减少泡沫的产生，如改良培养基配方，减少一些产生泡沫的物质。其次是在产生泡沫时，想方设法消除，为了减少时间、耗材以及人工成本，更加为了使实验效果更加精确、稳定，北京佳德发酵罐的自动控制（消泡、补料、补酸、补碱）、自动监控系统恰好可以做到让您放心、省心、省力，确保无后顾之忧
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