维生素E（dl-α-醋酸生育酚）的气相色谱仪

A.4.4 色谱分析条件
推荐的色谱柱及典型色谱操作条件见表 A.1，维生素 E（dl- α-醋酸生育酚）含量测定典型气相色谱图参见附录B 中图B.1，各组分的相对保留时间参见附录B 中表B.1。其他能达到同等分离程度的色谱柱和色谱条件均可使用。
表A.1 色谱柱和典型色谱操作条件
A.4.5 分析步骤
A.4.5.1 内标溶液的制备
称取十六酸十六醇酯适量，加正己烷溶解，稀释后的溶液每1mL含3mg十六酸十六醇酯，摇匀，作为内标溶液。
A.4.5.2 对照品溶液的制备称取约 30mg 维生素E对照品，精确至0.0001g，置 10 mL 棕色容量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
A.4.5.3 样品溶液的制备
称取约 30 mg 实验室样品，精确至0.000 1 g，置 10 mL 棕色容量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。
A.4.5.4 系统适用性试验
用甲基聚硅氧烷为固定液的石英毛细管柱（30 m×0.53 mm），柱温280 ℃，理论塔板数按维生素E 计算，不得小于 3000，维生素E 与内标峰的分离度应大于3。
A.4.5.5 含量的测定
量取 1.0μL 样品溶液注入气相色谱仪, 记录色谱图，另取对照品溶液，同法测定。按内标法以峰面积计算出样品中C31H52O3 的含量。
A.4.6 结果计算
维生素E（C31H52O3）含量的质量分数w1，数值以%表示，按式（A.1 ）、（A.2 ）计算：
式中：
f —维生素E 的相对校正因子；
A1—对照品溶液中内标物的峰面积的数值；
A2—对照品溶液中维生素E 的峰面积的数值；
A3— 样品溶液中维生素E 的峰面积的数值；
A4— 样品溶液中内标物的峰面积的数值；
m1—对照品溶液中内标物的质量的数值，单位为毫克（mg ）；
m2—对照品溶液中维生素E 的质量的数值，单位为毫克（mg ）；
m3— 样品溶液中样品的质量的数值，单位为毫克（mg ）；
m4— 样品溶液中内标物质量的数值，单位为毫克（mg ）。
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于 1.5%。
A.5 酸度的测定
A.5.1 试剂和材料
A.5.1.1 无水乙醇。
A.5.1.2 **。
A.5.1.3 氢氧化钠标准滴定溶液：c(NaOH)=0.1mol/L。
A.5.1.4 酚酞指示液：10g/L乙醇溶液。
A.5.2 分析步骤
分别量取 15 mL 无水乙醇与**，置锥形瓶中，加0.5 mL 酚酞指示液，滴加氢氧化钠标准滴定溶液至微显粉红色，加 1.0g 实验室样品溶解后，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定，消耗的氢氧化钠滴定溶液不超过0.5 mL 即为通过试验。
A.6 重金属的测定
A.6.1 试剂和材料
A.6.1.1 硝酸。
A.6.1.2 硫酸。
A.6.1.3 盐酸。
A.6.1.4 甘油。
A.6.1.5 乙酸铵。
A.6.1.6 硝酸铅。
A.6.1.7 硫代乙酰胺。
A.6.1.8 氨试液：400→1000。
A.6.1.9 氢氧化钠溶液：c（NaOH ）=1mol/L。
A.6.1.10 盐酸溶液：c（HCl ）=2mol/L。
A.6.1.11 盐酸溶液：c（HCl ）=7mol/L。
A.6.1.12 氨水溶液：c（NH3·H2O）=5mol/L。
A.6.1.13 酚酞指示液：10g/L乙醇溶液。
A.6.1.14 乙酸盐缓冲液（pH3.5 ）：
取25g 乙酸铵，加水25mL溶解后，加7mol/L盐酸溶液38mL，用2mol/L盐酸溶液或氨水溶液准确调节pH至3.5（pH计），用水稀释至100mL。
A.6.1.15 硫代乙酰胺试液：
取4g硫代乙酰胺，精确至0.01g，加水使溶解成100mL，置冰箱中保存。临用前取5.0mL混合液[由15mL氢氧化钠溶液、5.0mL水及20mL甘油组成]，加上述1.0mL硫代乙酰胺溶液，置水浴上加热20s，冷却，立即使用。
A.6.1.16 铅标准溶液：
称取0.160g硝酸铅，精确至0.000 2 g，置于1000mL容量瓶中，加5mL硝酸与50mL水溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，移取10mL±0.02mL贮备液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL相当于10µg的Pb ）。配置与贮存用的玻璃仪器均不得含铅。
A.6.2 分析步骤
按《中华人民共和国药典》2005年版二部附录Ⅷ H重金属检查法第二法测定，具体方法如下：
称取1.0g± 0.01g实验室样品，置坩埚中缓缓炽灼至完全炭化，放冷；加硫酸0.5mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在500℃~600 ℃炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷，取遗留的残渣， 加硝酸0.5mL，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2mL，置水浴上蒸干后加水15mL，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加乙酸盐缓冲液（pH3.5 ）2mL，微热溶解后，移置纳氏比色管甲管中，加水稀释成25 mL；另取配制供试溶液的试剂，至瓷皿中蒸干后，加乙酸盐缓冲液（pH3.5 ）2mL与水15mL，微热溶解后，移置纳氏比色管乙管中，加标准铅溶液1.0mL，再用水稀释成25mL；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2 min，同置白纸上，自上向下透视，甲管中显示的颜色与乙管比较，不得更深。
附录 B
(资料性附录)
维生素 E（dl-α-醋酸生育酚）含量测定典型气相色谱图和各组分相对保留时间
1—— 溶剂（正己烷）
2—— 维生素E（dl-α-醋酸生育酚）
3—— 内标物（十六酸十六醇酯）
图B.1维生素E（dl-α-醋酸生育酚）含量测定典型气相色谱图
表B.1 维生素E （dl- α-醋酸生育酚）含量测定各组分相对保留时间